Mikroskopia świetlna w badaniach komórki roślinnej

Spis treści

Wykaz skrótów stosowanych w tekście IX
1.Podstawy optyki	1
1.1. Właściwości falowe światła	1
1.2. Polaryzacja światła	2
1.3. Rozszczepienie światła	2
1.4. Dyfrakcja i interferencja	4
2.Podstawy mikroskopii	6
2.1. Budowa mikroskopu świetlnego	6
2.2. Podstawowe pojęcia i wzory	7
2.3. Zasady pracy z mikroskopem	8
2.4. Mikroskopia stereoskopowa	12
2.5. Mikroskopia ciemnego pola	14
2.6. Określanie rzeczywistych wymiarów obiektów biologicznych	16
2.7. Analiza błędów pomiarowych	18
3.Mikroskopia kontrastowo-fazowa	20
3.1. Budowa mikroskopu kontrastowo-fazowego	21
3.2. Powstawanie obrazu w mikroskopie kontrastowo-fazowym	22
3.3. Przykłady zastosowania kontrastu fazowego	23
3.3.1. Obserwacje przyżyciowe protoplastu na przykładzie komórek cebuli	23
3.3.2. Obserwacje nici Hechta w komórkach cebuli	26
3.3.3. Obserwacje niebarwionych preparatów chromosomów	26
3.3.4. Obserwacje programowanej śmierci komórki	27
4.Mikroskopia fluorescencyjna	31
4.1. Podstawowe terminy	31
4.2. Budowa i zasada działania mikroskopu fluorescencyjnego	33
4.3. Autofluorescencja	34
4.4. Fluorochromy i białka zielonej fluorescencji	35
4.5. Przykłady zastosowania mikroskopu fluorescencyjnego	37
4.5.1. Fluorescencyjna metoda badania oksydoredukcyjnych właściwości żywych komórek z zastosowaniem błękitu Nilu i siarczanu błękitu Nilu	37
4.5.2. Wykrywanie kalozy w tkankach roślinnych za pomocą błękitu aniliny	38
4.5.3. Fluorescencyjna metoda wykrywania kwasów nukleinowych oranżem akrydyny	40
4.5.4. Znakowanie filamentów aktynowych: rodamina-faloidyna	41
4.5.5. Znakowanie mikrotubul	42
4.5.6. Wykrywanie komórek ulegających programowanej śmierci na podstawie fragmentacji DNA - test TUNEL	48
4.5.7. Fluorescencyjna metoda badania transportu symplastowego	51
4.5.8. Lokalizacja auksyny w komórkach za pomocą GFP	53
5.Mikroskopia polaryzacyjna	54
5.1. Budowa mikroskopu polaryzacyjnego	54
5.2. Teoretyczne podstawy badań w świetle spolaryzowanym	56
5.3. Przykłady zastosowania mikroskopu polaryzacyjnego	58
5.3.1. Obserwacje składników komórki przy skrzyżowanych polaroidach	58
5.3.2. Analiza anizotropowych składników komórki z wykorzystaniem "gipsówki".	60
5.3.3. Wyznaczanie kąta ułożenia fibryl celulozowych w ścianie komórkowej	63
6.Mikroskopia polaryzacyjno-interferencyjna	65
6.1. Budowa mikroskopu polaryzacyjno-interferencyjnego	65
6.2. Powstawanie obrazu w mikroskopie polaryzacyjno-interferencyjnym	67
6.3. Przykłady zastosowania mikroskopu polaryzacyjno-interferencyjnego	70
6.3.1. Określanie suchej masy jądra komórkowego - metoda jednorodnego pola z	70
7.Informacje uzupełniające	75
7.1. Laserowa skaningowa mikroskopia konfokalna	75
7.2. Interpretacja obrazów mikroskopowych	77
7.3. Obróbka obrazu mikroskopowego	82
7.4. Zasady przygotowania preparatów mikroskopowych	85
7.4.1. Wybrane procedury zatapiania i barwienia preparatów	90
7.5. Roztwory i ich stężenia	93
7.6. Pojęcie pH i roztwory buforowe	95
7.7. Przykłady buforów	97
7.8. Rodzaje wody używane w praktyce laboratoryjnej	101
7.9. Pipety i zasady pipetowania	101
7.10. Właściwe przedstawienie powiększeń dokumentacji zdjęciowej	103
7.11. Tabele	105
8.Literatura	106
Skorowidz	108